Сангер ДНҚ реттілігі қалай жұмыс істейді?
Сангер ДНҚ реттілігі қалай жұмыс істейді?

Бейне: Сангер ДНҚ реттілігі қалай жұмыс істейді?

Бейне: Сангер ДНҚ реттілігі қалай жұмыс істейді?
Бейне: ДНҚ құрылысы 2024, Қараша
Anonim

Сэнгер реттілігі нәтижесінде 3' ұшында дидеоксинуклеотидтермен аяқталатын әртүрлі ұзындықтағы ұзарту өнімдері түзіледі. Содан кейін кеңейту өнімдері капиллярлық электрофорез немесе CE арқылы бөлінеді. Молекулалар гельдік полимермен толтырылған ұзын шыны капиллярға электр тогы арқылы енгізіледі.

Осылайша, ДНҚ секвенирлеудің Сэнгер әдісі қандай?

Сэнгер реттілігі , сонымен қатар тізбектің үзілуі деп аталады әдіс , үшін техника болып табылады ДНҚ секвенциясы тізбекті аяқтайтын дидеоксинуклеотидтердің (ddNTPs) таңдамалы қосылуына негізделген ДНҚ in vitro кезінде полимераза ДНҚ репликация. Оны Фредерик жасаған Сангер және әріптестері 1977 ж.

Сонымен қатар, тізбекті тоқтату реттілігі қалай жұмыс істейді? Сангер ДНҚ реттілік ретінде де белгілі шынжыр - тоқтату әдісі реттілік . ddNTP нәтиже береді тоқтату ДНҚ тізбегінің тізбегін ажыратады, өйткені ddNTP-де нуклеотидтер арасында фосфодиэфирлік байланыстың түзілуіне қажетті 3'-ОН тобы жоқ. Бұл байланыссыз, шынжыр түзілетін нуклеотидтердің саны тоқтатылды.

Жай ғана, неге біз Сэнгердің тізбегін жасаймыз?

Сэнгер реттілігі а әдіс бойынша ДНҚ секвенциясы арқылы тізбекті аяқтайтын дидеоксинуклеотидтердің селективті қосылуына негізделген ДНҚ in vitro кезінде полимераза ДНҚ репликация. Оның әлі де қысқа оқуға қарағанда артықшылығы бар реттілік технологиялар (Illumina сияқты) бұл алады өндіру ДНҚ тізбегі > 500 нуклеотидті көрсетеді.

Сэнгер реттілігі дәл ме?

Сэнгер реттілігі 99,99% дәлдік клиникалық зерттеулердің «алтын стандарты» болып табылады реттілік . Дегенмен, жаңа NGS технологиялары да жоғары өткізу қабілетіне және бір үлгіге жұмсалатын төмен шығындарға байланысты клиникалық зерттеу зертханаларында кең таралған.

Ұсынылған: