Мазмұны:

Сіз клондарды қалай таңдайсыз?
Сіз клондарды қалай таңдайсыз?

Бейне: Сіз клондарды қалай таңдайсыз?

Бейне: Сіз клондарды қалай таңдайсыз?
Бейне: ӘЛЕУ. ОДЕССА МАМА. 18 АҚПАН. Шошқа майы рецепті. ПЫШАҚТАРҒА ШОЛУ 2024, Қараша
Anonim

Қашан таңдау а клондау , тамырлардың күшті, ақ және өсетін ортадан ынтамен шығып тұрғанына көз жеткізіңіз. Егер тамырлар қоңыр және шөгіп кетсе немесе басқаша әрекетсіз болып көрінсе, оны орнына қойып, жақсырақ іздеңіз.

Сонымен қатар, бір ұяшықты қалай клондауға болады?

  1. 200 мкл ортасы бар 96 шұңқырлы пластинаның бірінші шұңқырына (A1) ~16 000 ұяшықты салу үшін жасушаларды санаңыз.
  2. Құрамында A1 бар ұяшықтардан 100 мкл алып тастаңыз және B1-мен араластырыңыз, 100 мкл алып тастамас бұрын және C1 араластырмас бұрын жақсылап араластыру үшін 3 рет жоғары және төмен тамызыңыз.

Сондай-ақ, сүтқоректілердің жасушалық колониясын қалай таңдауға болады? Дифференциацияланбаған сауды таңдау үшін пластинаны микроскоптың астына қойыңыз колониялар . Колонияларды таңдаңыз P-20 тамшуырын пайдаланып, 10ul. Мұқият таңдау а колония бұзбай колония жалғыздыққа жасушалар , және оны трипсині бар 96 шұңқырлы пластинаға жіберіңіз. Тарту үшін тамшуырмен жоғары және төмен бірнеше рет тартыңыз колония.

Сәйкесінше, клондық цилиндрді қалай пайдаланасыз?

Қолдану стерильді орта қысқыштар, алыңыз а клондау цилиндрі . Тегіс түбін жайлап басыңыз цилиндр тегіс силиконды майға салып, кенет тік қозғалыспен алып тастаңыз. Егер дұрыс орындалса, бұл майдың түбіне біркелкі таралуын қамтамасыз етеді цилиндр . орнатыңыз цилиндр колония үстінде.

Тұрақты жасуша линиялары үшін колонияларды қалай таңдайсыз?

Тұрақты ұяшық сызықтарын құру протоколы төменде көрсетілгендей бірнеше қадамдарды қажет етеді:

  1. Оңтайлы таңдау антибиотик концентрациясын анықтау үшін өлтіру қисығын жасаңыз.
  2. Қажетті плазмидтік құрылымдары бар жасушаларды трансфекциялау
  3. Тұрақты поликлоналды колонияларды таңдап, кеңейтіңіз.
  4. Шектеулі сұйылту және кеңейту арқылы жалғыз клондарды анықтаңыз.

Ұсынылған: