Мазмұны:

Неліктен секвенирлеу алдында ПТР өнімдерін тазарту қажет?
Неліктен секвенирлеу алдында ПТР өнімдерін тазарту қажет?

Бейне: Неліктен секвенирлеу алдында ПТР өнімдерін тазарту қажет?

Бейне: Неліктен секвенирлеу алдында ПТР өнімдерін тазарту қажет?
Бейне: ПТР әдісі 2024, Мамыр
Anonim

Қажетті тексеру өнім болып табылады маңызды , ол спецификалық емес жетіспеушілікті растауды қамтиды өнімдер және праймер димерлері. Таза Реакциялық қоспаның жоғарылауы да болады қажетті келесі реакцияларға кедергі келтіретін және оқылмайтын реттілікке әкелетін біріктірілмеген праймерлерді және dNTP-лерді жою.

Сонымен қатар, неліктен ПТР өнімдерін тазарту қажет?

Саған керек ПТР өнімдерін тазарту байланыстырудың сәттілігін оңтайландыру үшін пайдаланылмаған праймерлерден, нуклеотидтерден және ферменттерден құтылу үшін өнім ның ПТР . Кімге тазарту the ПТР өнімдері , өлшемді алып тастау хроматографиясы қолданылады.

Сондай-ақ сұрақ туындауы мүмкін: эндонуклеаза қорытылуын шектеу алдында ПТР өнімдерін тазарту керек пе? Көпшілігі шектеу ферменттер белсенді ПТР буферлер. Қолданбаларды клондау үшін, тазарту ның ПТР өнімдері ас қорытуға дейін болып табылады қажетті құрамындағы белсенді термофильді ДНҚ-полимеразаны жою үшін ПТР қоспасы. ДНҚ полимеразалары бөлінген ДНҚ ұштарын өзгертіп, байлау өнімділігін төмендетуі мүмкін.

Адамдар сонымен қатар ПТР өнімдерін секвенирлеуге қалай дайындайсыз?

ПТР өнімдерінің тікелей реттілігі

  1. Дұрыс фрагментті күшейткеніңізге көз жеткізіңіз.
  2. Сіз барлық қалдық ПТР праймерлерін және біріктірілмеген нуклеотидтерді жоюыңыз керек.
  3. Егер ПТР праймерлері де секвенирлеу праймерлері болса, олардың біздің шарттарымызға сәйкес келетініне көз жеткізіңіз.
  4. Үлгіні шамадан тыс шоғырландырмаңыз!

Сіз ПТР өнімін ретке келтіре аласыз ба?

Тікелей Тізбектеу ның ПТР өнімдері . Тізбектеу ғана пайдаланады бір қолданылатын екеуінің орнына праймер ПТР . Егер сіз екі праймерді де алып тастамаңыз, Сіз істейсіз екі алу тізбектер оқуға болмайтын бір-бірінің үстіне қойылған. a пайдалану дұрыс ПТР үшін праймер реттілік бұл біздің шарттарымызға сәйкес келгенше.

Ұсынылған: