DdNTP пайдаланудың мақсаты қандай?
DdNTP пайдаланудың мақсаты қандай?

Бейне: DdNTP пайдаланудың мақсаты қандай?

Бейне: DdNTP пайдаланудың мақсаты қандай?
Бейне: Инъекциялық препараттарды дұрыс пайдалану 2024, Қараша
Anonim

DdNTP жатады Дидеоксинуклеотидтер ДНҚ секвенциясы үшін әртүрлі ұзындықтағы ДНҚ жіптерін алу үшін Сэнгер дидеокси әдісінде қолданылатын трифосфаттар. Бұл ДНҚ полимерленуінің (немесе ДНҚ ұзаруының) аяқталуына әкеледі, себебі бұл процесті жалғастыру үшін 3'-OH тобы қажет.

Сондықтан ddNTP неліктен реттілікте қолданылады?

Дидеоксинуклеотидтер ДНҚ-полимеразаның тізбекті ұзартатын ингибиторлары, қолданылған ДНҚ үшін Сэнгер әдісінде реттілік . Дидезоксирибонуклеотидтерде 3' гидроксил тобы болмайды, сондықтан бұл дидеоксинуклеотид тізбекте болғанда одан әрі тізбек ұзаруы болмайды. Бұл ДНҚ-ның тоқтатылуына әкелуі мүмкін жүйелі.

Сол сияқты, ddNTPs dNTP-ге қосыла ма? Бір немесе бірнешеу dNTPs репликация өнімдерін бейнелеуге көмектесу үшін радиоактивті таңбаланған. Соңында, әрбір түтік төрт арнайы нуклеотидтің біреуін алады дидеоксинуклеотидтер ( ddNTPs ). Дегенмен, енгізілгеннен кейін ДНҚ полимераза тізбекті одан әрі ұзарта алмайды, өйткені оған 3'-OH қажет. бекіту келесі нуклеотидке.

Сол сияқты сұрақ туындауы мүмкін: ddNTP реттілік реакциясын қалай тоқтатады?

Аз мөлшерде болған кезде реакцияларды ретке келтіру , дидеоксирибонуклеозидтрифосфаттар ( ddNTPs ) тоқтату реттілік реакциясы өсіп келе жатқан ДНҚ тізбектеріндегі әртүрлі позицияларда. ddNTPs реттілік реакциясын тоқтатады өйткені олар: ДНҚ полимеразаның шаблон тізбегінен түсіп кетуіне әкеледі. в.

Дидеоксинуклеотидтердің қатысуымен қандай әдісті қолдануға болады?

Сэнгер реттілігі – бұл а әдіс тізбекті аяқтаудың селективті қосылуына негізделген ДНҚ секвенциясы дидеоксинуклеотидтер in vitro ДНҚ репликациясы кезінде ДНҚ полимераза арқылы. 1977 жылы Фредерик Сэнгер және оның әріптестері әзірлеген ол ең кең таралған қолданылған реттілік әдіс шамамен 40 жыл бойы.

Ұсынылған: