Мазмұны:
Бейне: Рестриктаза ферменттері ДНҚ-ны қалай манипуляциялайды?
2024 Автор: Stanley Ellington | [email protected]. Соңғы өзгертілген: 2023-12-16 00:19
Бактерия а пайдаланады шектеу ферменті бактериофагтар немесе фагтар деп аталатын бактериялық вирустардан қорғайды. Фаг бактерияны жұқтырғанда, оның бактериясын енгізеді ДНҚ репликациялануы үшін бактерия жасушасына енеді. The шектеу ферменті фагтың репликациялануын болдырмайды ДНҚ оны көптеген бөліктерге кесу арқылы.
Сонымен, рестриктаза ферменттері ДНҚ-ға не істейді?
Рестрикциялық ферменттер . Зертханада, шектеу ферменттері (немесе рестрикциялық эндонуклеазалар ) кесу үшін қолданылады ДНҚ кішірек фрагменттерге. Кесулер әрқашан белгілі бір нуклеотидтер тізбегі бойынша жасалады. Әр түрлі шектеу ферменттері әртүрлі тану және кесу ДНҚ тізбектер.
Сондай-ақ сұрақ қоюы мүмкін, неге рестриктеуші ферменттер бактериялардың ДНҚ-сын кеспейді? Бактериялар бар шектеу ферменттері , деп те аталады рестрикциялық эндонуклеазалар , қай кесу қос жіпті ДНҚ нақты нүктелерде фрагменттерге бөлінеді. Бір қызығы, шектеу ферменттері өздерін бұзбаңдар ДНҚ . Бактериялар өз алдына ДНҚ кесуден шектеу ферменті метилденуі арқылы шектеу сайттар.
Сонымен қатар, шектеу ферменттері ДНҚ-ны қалай табады және кеседі?
А шектеу ферменті Бұл ДНҚ - кесу ферменті белгілі бір сайттарды таниды ДНҚ . Көптеген шектеу ферменттері жасайды теңселді қысқартулар олардың тану орындарында немесе оған жақын жерде, бір жіпті ілулі ұштарды шығарады. Екі болса ДНҚ молекулалардың сәйкес ұштары бар, олармен қосылуы мүмкін фермент ДНҚ лигаза.
Рестриктазаларды қалай таңдайсыз?
Рестриктеуші ферменттерді таңдаған кезде келесі ферменттерді таңдағыңыз келеді:
- Кірістіруді бүйірге қойыңыз, бірақ кірістіргіштің ішінен кеспеңіз.
- Реципиент плазмидасының (әдетте бірнеше клондау сайтында (MCS)) қалаған орнында болыңыз, бірақ плазмиданың басқа жерінен кеспеңіз.
Ұсынылған:
Барлық бактерияларда шектеу ферменттері бар ма?
Рестрикциялық ферменттер бактерияларда (және басқа прокариоттарда) кездеседі. Олар шектеу орындары деп аталатын ДНҚ -ның белгілі бір тізбегін таниды және байланыстырады
Сангер ДНҚ реттілігі қалай жұмыс істейді?
Сэнгер секвенциясы 3' ұшында дидеоксинуклеотидтермен аяқталатын әртүрлі ұзындықтағы ұзарту өнімдерінің түзілуіне әкеледі. Содан кейін кеңейту өнімдері капиллярлық электрофорез немесе CE арқылы бөлінеді. Молекулалар гельдік полимермен толтырылған ұзын шыны капиллярға электр тогы арқылы енгізіледі
Рекомбинантты ДНҚ-ны қалай анықтауға болады?
Рекомбинантты ДНҚ (немесе рДНҚ) екі немесе одан да көп көздерден алынған ДНҚ-ны біріктіру арқылы жасалады. Іс жүзінде бұл процесс көбінесе әртүрлі ағзалардың ДНҚ-сын біріктіруді қамтиды. Процесс рестрикция алаңдары деп аталатын нуклеотидтік негіздердің белгілі бір тізбегі арқылы анықталған нүктелердегі ДНҚ молекулаларын кесу және қайта қосу қабілетіне байланысты
Табиғатта шектеу ферменттері не үшін қолданылады?
Рестрикциялық фермент, сонымен қатар рестрикциялық эндонуклеаза деп аталады, молекула бойындағы белгілі бір жерлерде ДНҚ-ны ыдырататын бактериялар өндіретін ақуыз. Бактерия жасушасында рестриктазалар бөгде ДНҚ-ны ыдыратады, осылайша жұқтыратын организмдерді жояды
ПТР дидеокси ДНҚ секвенирлеуінде қалай рөл атқарады?
ПТР дидеокси ДНҚ секвенирлеуінде қалай рөл атқарады? ПТР қолдану үлгі ДНҚ-ның әлдеқайда төмен деңгейінен ДНҚ синтезінің анықталатын деңгейлеріне мүмкіндік береді. Неліктен ДНҚ секвенциясы кезінде дидеоксинуклеотидтің қосылуы «репликацияны тоқтататын» оқиға ретінде анықталады?