Мазмұны:

Плазмидаға генді қалай енгізуге болады?
Плазмидаға генді қалай енгізуге болады?

Бейне: Плазмидаға генді қалай енгізуге болады?

Бейне: Плазмидаға генді қалай енгізуге болады?
Бейне: 49 questions with iGEM NU_Kazakhstan [Project Presentation] 2024, Қараша
Anonim

Негізгі қадамдар:

  1. кесіп ашыңыз плазмида және ішіне «қою». ген . Бұл процесс рестриктаза ферменттеріне (ДНҚ-ны кесетін) және ДНҚ лигазасына (ДНҚ-ға қосылатын) сүйенеді.
  2. Кірістіру the плазмидаға түседі бактериялар.
  3. Көп өссін плазмида -бактерияларды тасымалдау және оларды ақуыз жасау үшін «зауыт» ретінде пайдалану.

Сондай-ақ, генді GCSE плазмидіне қалай енгізуге болады?

Бұл плазмидаға енгізіледі лигаза ферменттерін қолдану. the плазмида барады ішіне бактериялық жасуша. нәтижесінде трансгенді бактерия көбейеді ішінде адам инсулинін шығаратын миллиондаған бірдей бактериялар.

Сонымен қатар, сіз генді қалай субклондайсыз? үшін негізгі қадамдар Субклондау Сіз кірістіруіңізді негізгі вектордан босатасыз және тазартасыз, бұл кірістіруді дайындалған тағайындау векторына байланыстырасыз, бұл байлау реакциясын құзыретті бактериялық жасушаларға айналдырасыз. Содан кейін кірістіру үшін түрлендірілген ұяшықтарды экранға шығарасыз.

Осыны ескере отырып, генді клондаудың 4 қадамы қандай?

Классикалық рестрикциялық ферментті қорыту және байлау клондау хаттамаларында кез келген ДНҚ фрагментін клондау негізінен төрт қадамды қамтиды:

  • қызығушылық ДНҚ (немесе мақсатты ДНҚ) оқшаулануы,
  • байлау,
  • трансфекция (немесе трансформация) және.
  • скрининг/таңдау процедурасы.

Плазмиданы қалай күшейтуге болады?

Эксперименттік процедура

  1. ПТР іске қосыңыз және ПТР өнімін тазартыңыз: кірістірілген ДНҚ-ны күшейту үшін ПТР іске қосыңыз.
  2. ДНҚ-ны қорытыңыз:
  3. Гельді тазарту арқылы кірістіру мен векторды оқшаулаңыз:
  4. Векторыңызға кірістіруді байланыстырыңыз:
  5. Трансформация:
  6. Дайын плазмиданы бөліп алыңыз:
  7. Плазмидті реттілік арқылы тексеріңіз:

Ұсынылған: