Көк-ақ экранды орындау кезінде ақ бактерия колониялары бар?
Көк-ақ экранды орындау кезінде ақ бактерия колониялары бар?

Бейне: Көк-ақ экранды орындау кезінде ақ бактерия колониялары бар?

Бейне: Көк-ақ экранды орындау кезінде ақ бактерия колониялары бар?
Бейне: Бактерии | Удивительный мир Гамбола | Cartoon Network 2024, Қараша
Anonim

Керісінше, ақ колониялар өндіру үшін X-Gal метаболиздей алмайды көк түсі, өйткені олар енгізілген ДНҚ тасымалдайтын плазмиданы қабылдап, lacZ α генін бұзғаннан кейін функционалды β-галактозидаза түзбейді. Мыналар ақ колониялар бар рекомбинантты бактериялар және таңдалуы керек (1 -сурет).

Осылайша, барлық ақ және көк колонияларда плазмида бар ма?

The көк колониялар бар «Өзін -өзі» ұстанады плазмидалар сол істеу lac Z генін бұзатын ДНҚ кірістірулері жоқ. Ақ колониялар тасымалдайтын бактериялардан тұрады плазмидалар lac Z генін үзетін ДНҚ кірістіру фрагменттері бар. Таңдау ампициллин бойынша жүргізіледі құрамында орташа

Сол сияқты көк ақ скринингтің мақсаты не? The көк – ақ экран - бұл А. скринингтік вектор негізіндегі молекулалық клондау эксперименттерінде рекомбинантты бактерияларды жылдам және ыңғайлы анықтауға мүмкіндік беретін әдіс. Қызықты ДНҚ векторға байланған.

Осыны ескере отырып, көк-ақ колония скринингі дегеніміз не?

The көк - ақ экран Бұл скринингтік векторлық генді клондау кезінде табысты лигированиелерді анықтауға мүмкіндік беретін әдіс. Қызықты ДНҚ векторға байланған. Егер байлау сәтті болса, бактериялық колония болады ақ ; болмаса, колония болады көк.

Неліктен кейбір колониялар көк, ал басқалары ақ?

Кез келген колония құрамында плазмида бар (және де жұмыс істейтін β-галактозидаза гені) айналады көк β-галактозидаза белсенділігінің нәтижесі. Бұл α-комплементация деп аталады. Кірістіру β-галактозидаза генін бұзды, сондықтан бұл колониялар қалу ақ.

Ұсынылған: